Laboratorio di biologia molecolare (2017/2018)



Codice insegnamento
4S01911
Crediti
6
Coordinatore
Stefano Capaldi
Settore disciplinare
BIO/11 - BIOLOGIA MOLECOLARE
Lingua di erogazione
Italiano
L'insegnamento è organizzato come segue:
Attività Crediti Periodo Docenti Orario
Teoria 2 II sem. Stefano Capaldi

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Laboratorio [II turno] 4 II sem. Maria Teresa Valenti

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Laboratorio [I turno] 4 II sem. Stefano Capaldi

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Obiettivi formativi

L’obiettivo formativo primario del corso è rappresentato dall’apprendimento delle metodologie necessarie allo svolgimento delle più comuni pratiche di manipolazione del DNA. In particolare il corso tratta le principali tecniche di purificazione degli acidi nucleici, la loro separazione mediante elettroforesi, l'amplificazione del DNA e le metodologie per clonaggio in vettori batterici.
Nelle esercitazioni pratiche è' prevista l'applicazione delle principali tecniche di purificazione del DNA plasmidico e genomico, la separazione del DNA mediante elettroforesi su gel di agarosio, la sua digestione con enzimi di restrizione, la preparazione di costrutti genici e la loro trasformazione in E. coli.
Al termine del corso lo studente avrà appreso le nozioni basilari riguardanti la manipolazione del materiale genetico e sarà in grado di utilizzare le principali tecniche di laboratorio per il clonaggio di geni.

Programma

Teoria:
Il DNA ricombinate. Clonaggio di Geni.
Vettori batterici e non batterici. Librerie genomiche e di cDNA.
Manipolazione degli acidi nucleici. Digestione con endonucleasi di restrizione. Elettroforesi. Ligazione del DNA.
Reazione a Catena della Polimerasi (PCR). Applicazioni
Colutre batteriche. Trasformazione di cellule batteriche ed eucatriotiche.
Produzione di proteine da geni clonati.

Esercitazioni di Laboratorio:
Purificazione di DNA plasmidico
Purificazione di DNA genomico
Purificazione di RNA
Elettroforesi e purificazione del DNA da gel
Digestione con enzimi di restrizione
PCR e purificazione dell'amplicone
Trasformazione, colony PCR
Espressione di una proteina ricombinante e analisi mediante SDS PAGE e Western Blot.

Modalità d'esame

Relazione sull'attività di laboratorio ed esame orale

Testi di riferimento
Attività Autore Titolo Casa editrice Anno ISBN Note
Laboratorio Amaldi, Benedetti, Pesole, Plevani Biologia Molecolare (Edizione 3) Ambrosiana 2018 978-88-08-18518-1

Opinione studenti frequentanti - 2017/2018